牛冷凍精液的保存及使用   MVE液氮罐

精液冷凍保存是將精液進行特殊處理，保存在超低溫下,，以達到長期保存的目的,。通常采用液氮(—196℃)和干冰(—79℃)保存。其最大優(yōu)點是可長期保存,，使用不受時間,、地域以及種用雄性動物壽命的限制?？沙浞痔岣吖５睦寐省,，F(xiàn)將冷凍精液保存起來和怎樣進行解凍及給母牛輸精的有關技術(shù)操作介紹如下，供參考,。

一,、稀釋液的配方：

12%的蔗糖液75毫升、甘油5毫升,、卵黃液20毫升,。

二、稀釋方法：

將經(jīng)過檢查合格的精液(活力0?6以上,、精子密度中等)按1：2—5倍稀釋液進行稀釋,，其稀釋原則應保證每個顆粒精液中所含精子數(shù)不少于3000—4000萬個，解凍后呈直線前進運行的精子不少于1500萬個,。

三,、冷凍：

在裝有液氮的容器上置一銅紗網(wǎng),，距液氮面2厘米左右，使溫度維持在—80℃至—100℃,。將平衡后的精液用滴管按一定量(0?1毫升)滴于銅紗網(wǎng),、滴完最后一滴停3—5分鐘后,，當精液顆粒顏色變白時,，立即浸入液氮，并將全部顆粒取下,，收集于貯精瓶或紗網(wǎng)布袋內(nèi),，并做好標記，然后立即移入液氮罐中貯存,。

四,、解凍：MVE液氮罐

將預先配制好的2?9%檸檬酸的溶液1毫升，放入干凈的小試管中,，再置于40℃左右的溫水杯中,，迅速取顆粒冷凍精液1粒放入試管。輕輕搖動至化凍時,，從水杯中取出試管,，接著檢查精液活力，不低于0?3即為合格品,。

五,、重視保精、快速解凍與鏡檢

1,、根據(jù)液氮罐的性能要求,，定期添加液氮罐內(nèi)盛裝凍精的提筒不能露在液氮面外。

2,、取精時,，盡可能用長鑷子，切勿將提筒或紗布袋提到臨界線以上處(罐頂10厘米左右),。

3,、從液氮中取出細管凍精時，要輕輕甩1—2下,，將塑料細管的棉塞端放入35—40℃的溫水中,，把封口端留在水外1—1?3厘米外，待管內(nèi)精液融化一半時,，立即取出備用,。

4、解凍后的精液鏡檢時,，精子的活力不低于0?3方可用于輸精,，才能確保正常受精,。

5、解凍后的精液應立即輸配,，不宜停放時間過長,，應做到現(xiàn)解凍、現(xiàn)輸精,。

六,、適時輸精  MVE液氮罐

母牛正常排卵是在發(fā)情結(jié)束后6—12小時，精子在母牛生殖道的存活時間為12—20小時,，且還需要4—6小時的獲能過程,，才能與卵子結(jié)合受精。精子15分鐘就會到達輸卵管受精部位,，因此,，讓精子早于卵子到達輸卵管受精部位是提高受胎率的先決條件。

1,、適宜的輸精時間：是在母牛的發(fā)情后期,。此時母牛表現(xiàn)：精神平穩(wěn)，******部腫脹消失,，****不再流出透明液體,。直腸檢查卵泡脹大，表面緊張,，有一觸即破之感,。此時為最佳輸精時機。

2,、適宜的輸精部位：是在子宮頸內(nèi)口1厘米處即子宮體基部,，過淺易導致精液外流，過深易損傷子宮內(nèi)粘膜,。

3,、適宜的輸精方法：直腸把握子宮頸輸精法。將母牛保定,，左手插入母牛直腸輕輕握住子宮頸后端,，右手將輸精器自陰門向斜上方緩慢插入5—10厘米(以避開尿道口)再改為平插送到子宮頸口，緩慢越過子宮頸管中的皺壁,，到達子宮頸基部,，徐徐注入精液后，緩緩抽出輸精器,。

4,、適宜的輸精次數(shù)：以1—2次為宜?？稍诎l(fā)情母牛發(fā)情高潮后,，黃牛在發(fā)情高潮后6—12小時,，水牛在發(fā)情高潮后18—20小時進行第一次輸精，前后間隔8—12小時再進行第二次輸精,。