隨著科技的進步 MVE液氮罐 也被眾多領域所應用,,不管是生活中還是生產(chǎn)中都能看到它的身影,,如醫(yī)療行業(yè),生物醫(yī)學行業(yè),,金屬生產(chǎn)行業(yè)以及精密儀器等,。今天為大家介紹的是細胞在液
隨著科技的進步
MVE液氮罐也被眾多領域所應用,,不管是生活中還是生產(chǎn)中都能看到它的身影,如醫(yī)療行業(yè),,生物醫(yī)學行業(yè),,金屬生產(chǎn)行業(yè)以及精密儀器等。今天為大家介紹的是細胞在液氮罐保存方法及步驟
一,、
MVE液氮罐的應用范圍及用途
1.在生物醫(yī)學行業(yè)中的應用:目前主要是用于牛,、羊等優(yōu)良種公畜以及珍惜動物的精液保存,以及遠距離的運輸和醫(yī)學中的疫苗,、菌毒種,、細胞以及人、動物的器官等浸泡于成都金鳳液氮罐儲存的液氮中,,長期活性保存,。
2.在金屬生產(chǎn)行業(yè)中的應用:利用成都金鳳液氮罐中儲存的液氮對金屬材料進行深冷處理,可以改變金屬材料的金相組織,,顯著提高金屬材料的硬度,、強度和耐磨性能。
精密儀器電子行業(yè)中的應用:將精密零件經(jīng)過液氮深冷處理后進行裝配,,提高零件裝配質量,,從而提高設備或儀器的整機性能,。
3.醫(yī)療衛(wèi)生行業(yè)的應用:用液氮容器內儲存的液氮作為制冷劑進行手術,,治療或冷藏冷凍細胞,、組織等。冷療儀用于醫(yī)院臨床各科室能夠代替手術,,安全無毒,,無害痛苦少,不損害健康組織,,殺菌效果良好,。
4.美容領域的應用:主要用液氮的超低溫來處理皮膚表層。如采用手術治療,,疤痕往往是不可避免的后遺性缺陷,,而冷凍治療卻不會出現(xiàn)這些情況,而且效果也比較理想,。
二,、細胞在液氮罐保存步驟:
怎么在液氮罐里儲存細胞呢?一般來講,凍存細胞的步驟會影響到細胞復蘇時的活力,,所以在使用液氮罐儲存細胞時應小心并按步驟操作:
1,、預先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存預冷;
2,、用胰酶對細胞進行消化:倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,,PBS沖洗兩次,用胰酶消化細胞(盡可能溫和);
3,、再次用完全培養(yǎng)液懸浮細胞,,將預冷的凍存液加入消化完全的細胞中,用滴管輕輕吹打混勻,。
4,、在每支凍存管中加入1ml細胞液,密封后標記凍存細胞名稱和凍存日期,。
5,、凍存步驟的細致直接關系到細胞復蘇時的活力,如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,,放入液氮罐最好;或者可以在4℃,,2h;
三、細胞在
MVE液氮罐的儲存分為兩種:
液氮罐里一般灌有低溫液氮,,細胞的儲存需要低溫環(huán)境,,放入-196度的液氮里對細胞是長期保存的一個適合的環(huán)境。常規(guī)液氮罐是將細胞存入液氮罐的液相里儲存,,有專用的方形抽屜式提籃,,2ml凍存管放入凍存盒然后再放入提籃后浸入液氮里,完全浸入,。使細胞完全處于液氮-196度環(huán)境下,,才能夠長期保存細胞,。
還有一種是氣相儲存,氣相儲存的話,,溫度比液相儲存要高一些,,不過也能達到-190度,對于細胞儲存來講,,也是足夠了的,。而且還能解決長期以來液相儲存細胞經(jīng)常出現(xiàn)而又難以避免的一些問題,比如樣品污染,,出罐爆管等等,。相對來說,液相液氮罐相比氣相來說,,相同體積的液氮罐保存的時間也久一些.氣相凍存的溫度稍微高一些,但相同體積的液氮罐保存的時間短一些(液氮量少,所以加液氮的頻率要高一些).氣相需要頻繁加液氮,。